ノックインマウスとは

ノックインマウスは、外来遺伝子をマウスゲノム上に導入し、遺伝子、タンパク質の機能を解析する際に用いるマウスです。外来遺伝子の挿入により、同時に内在性遺伝子を破壊するような設計、また、ROSA26遺伝子座への挿入によるユビキタスな発現など、様々な設計をすることができます。マウスタンパク質の局在を調べるためレポータータンパク質との融合もノックインマウス作製に該当します。
弊社では、CRISPR/Cas9の系を用いて、最大2kbpまでのノックインが可能になっており、点変異マウス、レポーターマウス、ヒト化マウスの作製が可能でございます。

ノックインマウスの図

ノックインマウス作製

点変異マウス作製

点変異の図

点変異マウスの作製

ガイドRNA、ssOligoDNA、Cas9タンパク質を用いて、点変異マウスを作製致します。
ガイドRNAの切断効率によって、点変異の効率が変わるます。
従いまして、予備実験を行い、その後に点変異受精卵、マウス作製を行います。

点変異マウス作製の料金

商品名 価格
F0ゲノム編集受精卵サービス 54.5万円~(予備実験を含む)
F0塩基欠損マウスサービス 要相談

※徳島大学ならびに納品先研究機関において、当該遺伝子の遺伝子実験と動物実験実施の承認を得るための手続き、その他書類作製時間を除きます。

点変異マウス作製のマイルストーン

点変異マウス作製のマイルストーン

長鎖ノックインマウス作製

長鎖ノックインの図

長鎖ノックインマウスの作製

ガイドRNA、lssOligoDNA、Cas9タンパク質を用いて、長鎖のノックインマウスを作製致します。ガイドRNAの切断効率によって、ノックインの効率が変わりますので、予備実験を行います。その後、lssODNの設計・構築を行い、長鎖ノックインマウスを作製していきます。

長鎖ノックインマウスの納期と料金

商品名 価格 納期
F0長鎖ノックインマウス作製サービス 要相談 要相談

※徳島大学ならびに納品先研究機関において、当該遺伝子の遺伝子実験と動物実験実施の承認を得るための手続き、その他書類作製時間を除きます。

長鎖ノックインマウス作製のマイルストーン

長鎖ノックインマウス作製のマイルストーン

オプション

ゲノム編集受精卵オプション

オプション名 詳細
受精卵追加
価格:60,000円/25個
受精卵作製サービスで、25個単位で納品する受精卵を追加できます。
頭数を確保したいときにお使いください。
遺伝子配列解析
価格:5,000円/検体
作製されましたマウスの尾部サンプルより、SEQ解析でのジェノタイピングを行います。サンガー法によるダイレクトシークエンスを行うため、波形が見えにくい、モザイクかどうかの判断がつかないなどの場合がございます。

ゲノム編集マウスオプション

オプション名 詳細
マウス繁殖(自然繁殖)
価格:200,000円~/1世代
ゲノム編集マウスを、追加で飼育・繁殖するサービスです。メス2匹単位での交配となり、産仔マウスの遺伝子配列解析も行います。体外受精による繁殖、受精卵納品の場合は別途費用が発生致します。標準サービスではF0世代のマウスの納品になりますが、F1世代での納品もしくは頭数を確保したい場合にご依頼ください。
NGS解析NEW
価格:150,000円/系統
ゲノム編集マウスの配列決定時にサンガー法によるダイレクトシークエンスの代わりにNGS解析を行います。モザイク個体など、ダイレクトシークエンスでの配列解析が難しい場合でも、しっかりとした配列決定が可能です。
凍結精子/胚作製NEW
価格:100,000円(凍結胚)
   50,000円(凍結精子)
ゲノム編集マウスを対象に、オスマウスからの凍結精子の作製、あるいは野生型マウスとの体外受精卵の凍結胚の作製を行い、納品します。特殊系統の場合は、ご相談ください。
特殊系統対応サービスNEW
価格:別途ご相談
B6などの近交系以外のマウス系統や、ユーザー様の保有するマウスに対して、ゲノム編集を行うユーザー様はお申込みください。系統によりゲノム編集の条件検討が必要となります。
マウス追加オプションNEW
価格:5,000円/匹~
2匹を超える目的ゲノム編集マウスが作製できた場合、追加で納品致します。点変異作製の際に作出された塩基欠損マウスや、ゲノム編集の切断パターンごとの個体差を確認したり、頭数を確保する場合にご注文ください。なお、目的ゲノム編集の有無の確認のみ行います(詳細解析結果は別料金)。また、別途輸送費が発生する場合があります。

その他マウスサービス

オプション名 詳細
凍結精子/胚保管NEW
価格:40,000円/年/系統
ユーザー様より凍結精子、凍結胚をお預かりし、弊社にて1年間凍結保存状態にて保管をします。(保管サービス、1年毎に更新手続きが必要です。)
凍結精子/胚作製
価格:210,000円(凍結胚)
   100,000円(凍結精子)
ユーザー様よりオスマウスを搬入し、凍結精子の作製、あるいは野生型B6メスマウスとの体外受精卵の凍結胚の作製を行い、納品します。特殊系統の場合は、ご相談ください。
個体復元(胚)
価格:250,000円
個体復元(精子)
価格:350,000円
ユーザー様よりご提供の凍結胚、あるいは凍結精子を用いた体外受精卵をレシピエントマウス3匹に移植を行います。アイソラックにて飼育を行い、産仔マウスを最大8週齢まで飼育します。ジェノタイピングが必要な場合は、別途費用を頂きます。特殊系統の場合は、ご相談ください。
コンサルティングNEW
価格:別途ご相談
gRNAの設計のみ、2遺伝子同時ゲノム編集マウスの作製、制限酵素サイトを追加、偽遺伝子との判別など、お気軽にご相談ください。

ご注文の一例

【点変異マウスのF0で、モザイク個体の判別をご希望する場合】

点変異マウスのF0で、モザイク個体の判別をご希望する場合

【生殖系列にのった塩基欠損マウス(F1世代)が欲しい場合】

生殖系列にのった塩基欠損マウス(F1世代)が欲しい場合

*F1マウスの場合は、原則ヘテロ納品になります。

参考文献

  1. Hashimoto, M. and Takemoto, T*. Electroporation enables the efficient mRNA delivery into the mouse zygotes and facilitates CRISPR/Cas9-based genome editing. Sci. Rep. 5, 11315; doi: 10.1038/srep11315 (2015).
  2. Hashimoto M, Yamashita Y, Takemoto T*.Electroporation of Cas9 protein/sgRNA into early pronuclear zygotes generates non-mosaic mutants in the mouse. Dev. Biol. 418: 1-9 (2016).
  3. Tanihara F, Takemoto T*, Kitagawa E, Rao S, Do L, Onishi A, Yamashita Y, Kosugi C, Suzuki H, Sembon S, Suzuki S, Nakai M, Hashimoto M, Yasue A, Matsuhisa M, Noji N, Fujimura T, Fuchimoto Di, Otoi T*. Somatic cell reprogramming-free generation of genetically modified pigs. Science Advances. 2 (9) e1600803 (2016).