基因编辑小鼠

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节郎科技提供由GEEP法的基因编辑小鼠,GEEP法是用于简单高效的基因编辑方法,使我们能够在短时间内生产基因编辑产品。我们的做法是在与用户进行详细讨论后生产客制化的基因编辑产品。您可以选择各种交付方式(例如:F0受精卵,基因分析的F2小鼠)或者我们也有额外提供NGS分析的服务。

基因敲除小鼠

基因敲除小鼠是指,通过利用CRISPR/Cas9进行基因编辑使1个及以上的基因缺失的小鼠。尽管基因的碱基序列是确定的,但是在基因产物的功能不明确时,这是推定该功能的重要模型动物。将敲除全身细胞中的靶基因。
Knock out mice

碱基缺失小鼠

利用向导RNA(gRNA)与Cas9蛋白质,通过碱基缺失诱导移码突变,破坏靶基因。
Base-deleted mouse

外显子缺失小鼠

同时使用2种向导RNA,使瞄准的外显子的上游与下游的碱基缺失,使整个外显子缺失。能够切实地破坏基因的功能域。
Exon-deleted mouse

条件性基因敲除小鼠

在瞄准的外显子的上游与下游插入loxP序列。与Cre驱动(Cre-driver)小鼠杂交,诱导组织特异性基因破坏(敲除组织特异性基因)。
Flox mouse

敲入小鼠

这是将外源基因导入到小鼠基因组中、分析基因及蛋白质的功能时使用的小鼠。能够进行各种各样的设计,例如,通过插入外源基因进行同时破坏内源性基因,通过插入到ROSA26位点取得普遍性发现,等等。为了调查小鼠蛋白质的局部结构而与报告蛋白融合也属于敲入小鼠制作。
Knock in mice

点突变小鼠

本公司使用向导RNA、ssOligoDNA、Cas9蛋白质,制作点突变小鼠。
Point mutation mouse

长链敲入小鼠

本公司使用向导RNA、供体NDA、Cas9蛋白质,制作长链的敲入小鼠。
Long-chain knock-in mouse

GEEP法与VIKING法

GEEP法是指,通过电穿孔将Cas9蛋白质及gRNA等基因编辑工具导入受精卵的方法,能够以高通量、低成本且损伤小的形式,将CRISPR/Cas9基因编辑工具导入受精卵。传统的微注射法不仅要求操作技术,而且还需要专用设备,而GEEP法所需的技术仅仅是将受精卵排列在电极上。此外,不需要介入一个一个操作受精卵的繁杂作业,能够同时将基因编辑工具导入到多个(20~200个)受精卵,并在人工授精后的卵保持新鲜期间,短时间以均一的条件低侵袭地进行基因编辑,可望高效率地获得基因编辑生物。

Reference

  1. Hashimoto, M. and Takemoto, T*. Electroporation enables the efficient mRNA delivery into the mouse zygotes and facilitates CRISPR/Cas9-based genome editing. Sci. Rep. 5, 11315; doi: 10.1038/srep11315 (2015).
  2. Hashimoto M, Yamashita Y, Takemoto T*.Electroporation of Cas9 protein/sgRNA into early pronuclear zygotes generates non-mosaic mutants in the mouse. Dev. Biol. 418: 1-9 (2016).
  3. Tanihara F, Takemoto T*, Kitagawa E, Rao S, Do L, Onishi A, Yamashita Y, Kosugi C, Suzuki H, Sembon S, Suzuki S, Nakai M, Hashimoto M, Yasue A, Matsuhisa M, Noji N, Fujimura T, Fuchimoto Di, Otoi T*. Somatic cell reprogramming-free generation of genetically modified pigs. Science Advances. 2 (9) e1600803 (2016).
  4. Sawatsubashi S*, Joko Y, Fukumoto S, Matsumoto T, Sugano SS*. Development of versatile non-homologous end joining-based knock-in module for genome editing. Sci Rep. 2018 Jan 12;8(1):593.
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